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項(xiàng)目簡(jiǎn)介：
本項(xiàng)目屬于生物科學(xué)中的病毒學(xué)研究領(lǐng)域。主要針對(duì)嚴(yán)重危害國(guó)民經(jīng)濟(jì)發(fā)展、社會(huì)和諧穩(wěn)定和人類生命健康的重大烈性傳染性人獸共患病，特別是禽流感、SARS、狂犬病等病毒性人獸共患病，開展病原基礎(chǔ)和應(yīng)用基礎(chǔ)層面的相關(guān)研究。
項(xiàng)目總體科技內(nèi)容是建立高效、系統(tǒng)、共享的病原－載體－基因表達(dá)－模型測(cè)試－快速診斷技術(shù)平臺(tái)，夯實(shí)我國(guó)人獸共患病綜合防制基礎(chǔ)。具體為：從全國(guó)各地收集臨床病料，分離鑒定禽流感、SARS、狂犬病等多種重要人獸共患病病原，開展全國(guó)范圍內(nèi)病原生態(tài)學(xué)與流行病學(xué)調(diào)查，進(jìn)行生物特性鑒定，分子背景分析和遺傳變異規(guī)律研究，建立病原毒株庫；進(jìn)行多種病毒主要保護(hù)性抗原基因和代表株全基因組克隆或感染性克隆，建立基因儲(chǔ)備庫，并進(jìn)行生物信息學(xué)分析；構(gòu)建大腸桿菌、酵母、桿狀病毒、痘苗病毒、雞痘病毒和DNA等多種真原核表達(dá)系統(tǒng)，表達(dá)功能基因或構(gòu)建重組體，進(jìn)行結(jié)構(gòu)、功能、免疫、模型和機(jī)制研究；建立了檢測(cè)基因、抗原、抗體快速診斷方法；構(gòu)建了多種單價(jià)、多價(jià)、多表位及偶聯(lián)佐劑候選基因工程疫苗，進(jìn)行了臨床實(shí)驗(yàn)免疫研究。
項(xiàng)目科學(xué)價(jià)值：在國(guó)內(nèi)早期啟動(dòng)了重大、烈性人獸共患傳染病病原基礎(chǔ)及診斷和防治研究，率先將"動(dòng)物的健康就是人類的安全"理念融入科學(xué)研究中，從理論上探究了人－禽(哺乳動(dòng)物)病原生態(tài)分布相關(guān)性、病原基因組進(jìn)化變異特點(diǎn)、不同功能基因用于診斷或疫苗研制的可行性等問題，從技術(shù)上突破了基因表達(dá)與診斷檢測(cè)瓶頸，建立了毒株庫、基因庫、系列基因表達(dá)系統(tǒng)平臺(tái)，探索了構(gòu)建安全、廉價(jià)基因工程疫苗可行模式，建立了快速診斷方法，為我國(guó)人獸共患病早期預(yù)警和綜合防控奠定堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)，提供有效技術(shù)儲(chǔ)備。
本研究獲得國(guó)家973、863、科技攻關(guān)、自然基金重點(diǎn)、面上及省市科技發(fā)展計(jì)劃等15個(gè)項(xiàng)目資助，發(fā)表論文83篇， 其中SCI收錄2篇，EI收錄10篇，論文他引96次，獲國(guó)家發(fā)明專利1項(xiàng)，并為軍隊(duì)重點(diǎn)學(xué)科和軍隊(duì)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)作出了重要貢獻(xiàn)。
主要發(fā)現(xiàn)點(diǎn)： 1.通過對(duì)我國(guó)雞痘病毒進(jìn)行基因組背景分析，克隆非必需區(qū)基因、人工設(shè)計(jì)合成啟動(dòng)子，在國(guó)內(nèi)外率先自主構(gòu)建了單向和雙向重組雞痘病毒表達(dá)載體，不僅為我國(guó)重組載體研究提供了新思路，而且為開發(fā)研制新型、高效、安全的禽用疫苗、動(dòng)物疫苗以及其他非禽屬疫苗開辟了全新領(lǐng)域，建立了基礎(chǔ)平臺(tái)。（分子病毒學(xué)，代表論文編號(hào)2）
2.應(yīng)用自主構(gòu)建的雞痘病毒真核表達(dá)系統(tǒng)，首次構(gòu)建了表達(dá)狂犬病糖蛋白基因、口蹄疫病毒P1-2A基因、共表達(dá)新城疫病毒F基因和傳染性法氏囊病病毒VP0基因的單價(jià)和多價(jià)重組雞痘病毒，并取得了國(guó)家生物安全委員會(huì)批文，對(duì)新城疫、傳染性法氏囊病及口蹄疫的防制具有重要指導(dǎo)意義和實(shí)用價(jià)值，國(guó)內(nèi)外未見相關(guān)報(bào)道。（分子病毒學(xué)，代表論文編號(hào)3、4）
3. 在國(guó)內(nèi)外率先自主構(gòu)建了重組痘苗病毒表達(dá)載體，解決了國(guó)內(nèi)外痘苗病毒載體不能高效表達(dá)的難題，并首次應(yīng)用痘苗病毒表達(dá)載體構(gòu)建了狂犬病基因工程候選疫苗。（分子病毒學(xué)，代表論文編號(hào)1、5）
4.首次在我國(guó)東北地區(qū)分離出新城疫自然弱毒株，對(duì)該毒株進(jìn)行了系統(tǒng)的生物學(xué)和分子生物學(xué)特性鑒定，并以此為基礎(chǔ)創(chuàng)制了新城疫弱毒候選疫苗，其具有免疫原性好、使用方便、價(jià)格低等特點(diǎn)，對(duì)于我國(guó)養(yǎng)雞業(yè)大量分散養(yǎng)殖的國(guó)情，該弱毒疫苗將對(duì)控制和預(yù)防新城疫的發(fā)生具有重要意義。（獸醫(yī)微生物學(xué)，代表論文編號(hào)6）
5.在國(guó)內(nèi)外首次提出應(yīng)用新城疫病毒結(jié)構(gòu)基因而不是全病毒構(gòu)建安全的治療性核酸疫苗，通過建立細(xì)胞模型，對(duì)其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、分子致病機(jī)制及細(xì)胞毒性進(jìn)行了研究，結(jié)果表明該侯選疫苗對(duì)細(xì)胞毒性低，且能誘發(fā)強(qiáng)的細(xì)胞免疫反應(yīng)，并獲得專利1項(xiàng)。（分子病毒學(xué)，代表論文編號(hào)7、8）
6.根據(jù)吉林省人群分離SARS冠狀病毒基因組背景，創(chuàng)制了抗SARS病毒N蛋白的重組核酸侯選疫苗，為SARS疫苗的研究提供了一條新途徑。（分子病毒學(xué)，代表論文編號(hào)9）
7.在我國(guó)早期啟動(dòng)大腸桿菌、桿狀病毒、畢赤酵母等表達(dá)體系，進(jìn)行了禽流感、SARS等病毒的基因組蛋白表達(dá)與調(diào)控機(jī)制研究，為疫病早期預(yù)警、快速診斷和綜合防控積累了理論與技術(shù)平臺(tái)。（分子病毒學(xué)，代表論文編號(hào)10）
主要完成人：
1. 金寧一
進(jìn)行所有課題的立項(xiàng)、前期設(shè)計(jì)、過程跟蹤監(jiān)督以及各個(gè)環(huán)節(jié)的的介入和參與，主要完成具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的雞痘病毒表達(dá)載體平臺(tái)的建設(shè)。投入該項(xiàng)研究的工作量占本人工作量的80%，對(duì)1、2、3、4、5、6、7發(fā)現(xiàn)點(diǎn)做出貢獻(xiàn)，10篇代表性論文的通訊作者。
2. 金擴(kuò)世
參加有關(guān)新城疫、SARS、口蹄疫等項(xiàng)目的前期設(shè)計(jì)、實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)，主要完成新城疫病毒、SARS冠狀病毒分離鑒定、基因克隆表達(dá)，新城疫、口蹄疫基因工程疫苗的應(yīng)用等。對(duì)1、2、4、7發(fā)現(xiàn)點(diǎn)做出貢獻(xiàn)，投入本項(xiàng)研究的工作量占本人工作量的80%，代表性論文3、6、10的作者。
3. 魯會(huì)軍
參加有關(guān)禽流感、SARS、口蹄疫等項(xiàng)目的前期設(shè)計(jì)、實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)，主要完成禽流感病毒、口蹄疫病毒分離鑒定、基因克隆表達(dá)，禽流感、口蹄疫快速診斷試劑及基因工程疫苗的研制及應(yīng)用等。對(duì)2、4、6、7發(fā)現(xiàn)點(diǎn)做出貢獻(xiàn)，投入本項(xiàng)研究的工作量占本人工作量的80%，代表性論文10的第一作者。
4. 李昌
參加有關(guān)口蹄疫、禽流感等項(xiàng)目的前期設(shè)計(jì)，主要完成口蹄疫及禽流感基因工程疫苗研制與應(yīng)用等。對(duì)2、6、7發(fā)現(xiàn)點(diǎn)做出貢獻(xiàn)，投入本項(xiàng)研究的工作量占本人工作量的50%，代表性論文2的作者。
5. 李霄
參加有關(guān)新城疫、禽流感等項(xiàng)目的研究，主要完成新城疫病毒分離鑒定、基因克隆表達(dá)，新城疫病毒抗腫瘤研究等。對(duì)2、5、7發(fā)現(xiàn)點(diǎn)做出貢獻(xiàn)，投入本項(xiàng)研究的工作量占本人工作量的50%，代表性論文7的第一作者。
10篇代表性論文：
1. Construction of vaccinia virus A-type inclusiom body protein, tandemly repeated mutant 7.5kDa protein,and hemagglutinin gene promoters support high levels of expression/ Arch Virol
2. Sequence analysis of a 7.3 Kb BamHI genomic fragment of fowlpox virus strain 282E4/Chinese Science Bulletin
3. 口蹄疫病毒二價(jià)DNA疫苗的構(gòu)建及實(shí)驗(yàn)免疫研究/高技術(shù)通訊
4. 共表達(dá)新城疫病毒F基因、傳染性法氏囊病毒VP0基因等重組雞痘病毒的抗原性和免疫原性/中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào)
5. 不同啟動(dòng)子對(duì)重組痘苗病毒中的表達(dá)狂犬病病毒糖蛋白基因的影響/中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào)
6. 新城疫病毒弱毒株分子生物學(xué)特性的研究/中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào)
7. 聯(lián)合應(yīng)用凋亡素基因、新城疫病毒HN基因及IL-18 基因?qū)谏亓龅囊种菩?yīng)研究/高技術(shù)通訊
8. 新城疫病毒HN基因與雞貧血病毒VP3 基因?qū)β闶蠛蒆CT腫瘤的治療/中國(guó)腫瘤生物治療雜志
9. SARS病毒核衣殼蛋白的表達(dá)與鑒定/高等學(xué)�；瘜W(xué)學(xué)報(bào)
10. 口蹄疫病毒3D基因在重組桿狀病毒中的表達(dá)及檢測(cè)/中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào)
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